Provette esami del sangue: cosa significano i colori

Sei in sala prelievi e guardi l'infermiere riempire tre, quattro, cinque provette con il tappo di colore diverso: lavanda, azzurro, giallo, grigio. La domanda arriva sempre: perché tutto questo sangue, e perché tanti tubi? La risposta è tecnica ma rassicurante: il colore del tappo indica l'additivo contenuto nella provetta, e ogni esame ha bisogno di un additivo preciso. Non è una decorazione: è una convenzione descritta dalla norma internazionale ISO 6710.¹ Qui trovi la tabella colore → additivo → esami, perché i tubi si riempiono in un ordine preciso, perché quello con il citrato deve arrivare fino al segno, quando un campione viene rifiutato e quanto sangue viene davvero prelevato.

In breve

• Il colore del tappo segnala l'additivo: anticoagulante, attivatore della coagulazione, inibitore della glicolisi o nulla. Non sono intercambiabili, quindi servono più provette.¹
• I colori seguono la norma ISO 6710 e le indicazioni CLSI, ma non sono universali: «il colore del tappo può variare […] per adempimento ai requisiti locali».¹
• Le provette si riempiono in un ordine preciso (emocoltura → citrato → siero → eparina → EDTA → inibitore della glicolisi) per evitare che l'additivo di un tubo contamini il successivo.²
• L'EDTA è il contaminante classico: lega il calcio e, essendo un sale di potassio, può far crollare la calcemia e impennare il potassio in una provetta di biochimica.³
• Le provette con citrato vanno riempite fino al segno: il rapporto sangue/anticoagulante è fisso (1 parte di citrato ogni 9 di sangue) e un tubo poco pieno falsa gli esami di coagulazione.¹⁴
• Se ti richiamano per ripetere il prelievo non è un brutto segno: è il controllo di qualità che ha funzionato. La causa più frequente di non conformità è il campione emolizzato (40–70% dei casi).⁵

Perché il colore del tappo non è un dettaglio

A seconda dell'esame il campione deve arrivare in laboratorio in uno stato preciso: sangue intero che non coagula (grazie a un anticoagulante) per l'emocromo completo, che deve contare globuli e piastrine intatti; siero, il liquido limpido che resta dopo la coagulazione e la centrifugazione, ottenuto con un attivatore e spesso un gel separatore; oppure plasma, simile al siero ma ottenuto senza far coagulare il sangue.¹

Il punto essenziale: gli anticoagulanti non sono intercambiabili. Quello perfetto per un emocromo rovinerebbe un esame della coagulazione, e viceversa. Ogni uso ha quindi il suo additivo e, per riconoscerlo a colpo d'occhio, il suo colore di tappo.

Attenzione a una sfumatura che pochi raccontano. I codici colore sono largamente standardizzati, non universali. Le istruzioni d'uso conformi alla ISO 6710 avvertono che i colori indicati sono «un esempio di colori standard» e che il tappo può cambiare tinta per adeguarsi ai requisiti locali.¹ La realtà italiana lo conferma: nel documento «Tipologia delle provette» dell'ASST della Valcamonica la provetta per la chimica clinica di routine — con attivatore e separatore, cioè per il siero — ha il tappo blu chiaro, non giallo-oro; l'emoglobina glicata si preleva in una provetta con EDTA dal tappo blu notte.⁶ Morale: la tabella qui sotto è un'ottima bussola, ma la vera referenza è l'additivo stampato sull'etichetta.

Che cosa fa ogni additivo

Capire la chimica rende il codice colore trasparente:¹

• EDTA — lega gli ioni calcio e blocca la coagulazione: il sangue resta liquido e le cellule mantengono la forma, ideale per contarle. È l'additivo dell'ematologia e dell'immunoematologia (gruppi sanguigni e fattore Rh, test di Coombs indiretto).
• Citrato di sodio — sequestra anch'esso il calcio, ma in modo reversibile e in un rapporto esatto (1 di citrato ogni 9 di sangue): il laboratorio può così far ripartire la coagulazione in condizioni controllate per misurarla (tempo di protrombina, aPTT, fibrinogeno).
• Attivatore della coagulazione ± gel — obiettivo opposto: microparticelle di silice accelerano la coagulazione per ottenere il siero; il gel forma poi una barriera tra siero e cellule.
• Eparina — attiva l'antitrombina e fornisce rapidamente plasma, utile in urgenza.
• Fluoruro di sodio — inibitore della glicolisi: blocca gli enzimi con cui le cellule continuano a consumare glucosio dentro la provetta. Senza di esso la glicemia risulterebbe falsamente bassa.

Tabella: colore, additivo, esami

Riferimenti correnti in Italia: la tinta esatta e alcune corrispondenze possono cambiare da laboratorio a laboratorio.¹⁶

Due avvertenze. Il giallo non è sempre lo stesso giallo: con gel separatore serve per il siero, con soluzione ACD o CPDA per la determinazione del gruppo sanguigno.¹ E la VES non si fa più ovunque nella provetta nera: molti laboratori italiani, con i metodi automatizzati odierni, la eseguono direttamente sulla provetta viola con EDTA dell'emocromo — una provetta in meno per te.⁶

L'ordine di prelievo: ecco perché tanti tubi, e in quell'ordine

Questo è il punto che dà senso a tutto il resto. Quando si prelevano più provette, non si riempiono a caso. La raccomandazione congiunta EFLM-COLABIOCLI, tradotta e pubblicata in italiano da SIBioC su Biochimica Clinica, indica questa sequenza:²

1. provetta per emocoltura;
2. provetta con citrato (azzurra);
3. provetta senza additivi o con attivatore della coagulazione (siero);
4. provetta con eparina (verde);
5. provetta con EDTA (lavanda);
6. provetta con inibitore della glicolisi (grigia);
7. altre provette.

Il motivo è la contaminazione crociata: mentre il sangue attraversa l'ago e il portaprovette verso ogni tubo successivo, una traccia dell'additivo precedente può essere trascinata nel seguente e falsare un risultato. Anche l'Ospedale Pediatrico Bambino Gesù elenca la «raccolta campioni, secondo la corretta sequenza delle provette» tra i passaggi del prelievo.⁷

L'EDTA è il colpevole abituale. Lega il calcio ed è un sale di potassio: un sospetto di EDTA finito in una provetta di biochimica può far crollare la calcemia e impennare il potassio, producendo una «iperkaliemia» allarmante ma del tutto artificiale, capace di far scattare accertamenti inutili — in laboratorio è dimostrato che l'aggiunta di EDTA altera magnesio, calcio e potassio del campione.³ Anche eparina e citrato possono migrare e perturbare gli esami a valle.⁸ Ecco perché la provetta con EDTA si preleva dopo quelle per il siero e per l'eparina, mai prima.

Va però detta tutta la verità, perché la scienza qui è più sfumata. Con i moderni sistemi chiusi sottovuoto la contaminazione da EDTA è improbabile se si rispettano le buone pratiche: uno studio dedicato non ha trovato tracce di EDTA nei campioni prelevati subito dopo una provetta K3EDTA.³ Un altro lavoro su 388 pazienti non ha rilevato contaminazione, ma ha osservato che l'ordine influenza comunque il potassio.⁹ Il documento SIBioC riconosce il dibattito e conclude in modo netto: poiché «non vi è alcun evidente svantaggio nel seguire l'ordine di prelievo», la sequenza va rispettata senza eccezioni.²¹⁰ È una cintura di sicurezza: non serve tutti i giorni, ma nessuno guida senza.

Riempimento e miscelazione: due gesti che decidono tutto

La provetta con citrato è la più esigente. Il rapporto sangue/anticoagulante è fisso — 1 parte di citrato ogni 9 di sangue — quindi il tubo deve arrivare fino al segno: un riempimento inferiore al 90% del volume previsto va evitato.¹² Non è teoria: uno studio classico ha mostrato che i tubi poco pieni allungano artificialmente PT e aPTT, con effetto più marcato usando citrato al 3,8%.⁴ Se il laboratorio rifiuta una provetta azzurra «poco piena», sta proteggendo il tuo INR. Per lo stesso motivo, quando si usa un set a farfalla e la provetta di coagulazione è la prima della serie, si preleva prima una provetta di scarto: il tubicino contiene aria che lascerebbe il tubo citratato sotto-riempito.²

Poi c'è la miscelazione: la provetta va capovolta delicatamente — mai agitata — un'inversione dopo ogni tubo e altre 4 alla fine, per un totale di cinque.² Troppo energica provoca schiuma ed emolisi; insufficiente può far coagulare il sangue in una provetta anticoagulata.¹

Perché a volte una provetta viene rifiutata

Capita, ed è meno grave di quanto sembri.

• Campione emolizzato. L'emolisi è «la rottura dei globuli rossi con conseguente dissoluzione dell'emoglobina nel plasma o siero» ed è la causa più frequente di non conformità (40–70%): dipende spesso da aghi troppo sottili, laccio emostatico troppo stretto o prelievi traumatici.⁵ Non è un problema estetico: fa sovrastimare potassio, LDH, AST, ALT, ferro e creatinina e sottostimare sodio, cloro e glucosio, già a livelli appena visibili a occhio nudo.¹¹ Da qui l'importanza degli elettroliti su un campione integro.
• Campione coagulato. Sangue raccolto in provetta con anticoagulante che presenta coaguli visibili, tipicamente quando «il prelievo è difficoltoso e prolungato nel tempo» o quando la provetta «non viene adeguatamente miscelata capovolgendola». Falsa emocromo, coagulazione, VES e ammonio, con piastrine falsamente basse.¹²
• Quantità insufficiente, soprattutto nelle provette con citrato,² o identificazione non corretta.

In tutti questi casi il laboratorio non referta un risultato dubbio: chiede un nuovo prelievo. Se ti richiamano, il controllo di qualità ha funzionato.

Quanto sangue viene prelevato in tutto?

È la seconda grande fonte d'ansia, e i numeri rassicurano. Le provette per adulti raccolgono in genere 2–4 mL ciascuna: 2 mL quella con EDTA, 2,7 mL quella con citrato, 3,5 mL quella per siero, 4 mL quella con eparina.⁶ Un controllo con quattro provette raccoglie quindi circa 10–13 mL, un paio di cucchiai da tavola: meno di un trentesimo dei 450 mL di una donazione di sangue intero, che un adulto sano tollera senza conseguenze e recupera in pochi giorni.¹³

L'unico contesto in cui il volume conta davvero è il ricovero prolungato, dove i prelievi ripetuti contribuiscono all'anemia: uno studio randomizzato su 25 terapie intensive ha trovato, in un'analisi secondaria preordinata su 27 411 pazienti, una riduzione delle trasfusioni passando a provette di volume ridotto, senza compromettere le analisi.¹⁴

E il numero di tubi? Riflette gli additivi diversi richiesti dai tuoi esami, non una quantità di sangue «necessaria»: emocromo → una provetta lavanda; biochimica (funzionalità renale, funzionalità epatica, profilo lipidico, TSH, magnesio) → una sola provetta per siero, condivisa fra decine di dosaggi; coagulazione → una azzurra; glicemia dedicata → una grigia. Un controllo annuale che unisce emocromo, biochimica e colesterolo richiede spesso solo due provette: una lunga lista di esami non significa una lunga fila di tubi. Per il resto, vedi come si svolge il prelievo e quali esami richiedono il digiuno.

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Domande frequenti

Che colore ha la provetta per l'emocromo? La provetta lavanda/viola con EDTA: impedisce la coagulazione e mantiene intatti globuli e piastrine, così che l'automa possa contarli.¹⁶

Perché mi prelevano più provette? Perché i tuoi esami richiedono sangue conservato in modi diversi — sangue intero, siero o plasma — con additivi non intercambiabili: ogni provetta copre una categoria di analisi.¹

Esiste un ordine per riempire le provette, e conta davvero? Sì: emocoltura, citrato (azzurra), siero, eparina (verde), EDTA (lavanda), inibitore della glicolisi (grigia), altre. Serve a evitare la contaminazione crociata: quella da EDTA altera calcio, magnesio e potassio,³ ed eparina e citrato possono anch'essi migrare.⁸ Con i sistemi chiusi moderni il rischio è basso, ma l'ordine resta raccomandato senza eccezioni perché non ha alcuno svantaggio.²⁹¹⁰

Perché la provetta azzurra deve essere piena fino al segno? Perché il rapporto sangue/citrato è fisso (9 : 1). Un tubo sotto-riempito allunga artificialmente PT e aPTT e va riempito ad almeno il 90% del volume previsto.²⁴

Perché mi hanno richiamato per rifare il prelievo? Di solito perché il campione era emolizzato (40–70% delle non conformità), coagulato, insufficiente o mal identificato.⁵¹² È una misura di sicurezza, non un segno che qualcosa non va nella tua salute.

I colori sono uguali in tutti i laboratori? Seguono la norma ISO 6710 e le indicazioni CLSI, ma i produttori avvertono che la tinta può variare per requisiti locali,¹ e diversi ospedali italiani usano codici propri.⁶ La referenza vera resta l'additivo scritto sull'etichetta.

Quanto sangue mi prendono? In genere 2–4 mL per provetta, circa 10–13 mL per un controllo con quattro tubi: meno di un trentesimo di una donazione da 450 mL.⁶¹³

Da ricordare

I colori delle provette non sono decorativi: ogni tappo segnala un additivo e, con esso, gli esami che quel sangue può servire — lavanda (EDTA) per l'emocromo, azzurro (citrato) per la coagulazione, oro/giallo (gel) per il siero, grigio (fluoruro) per la glicemia, verde (eparina) per il plasma. Il codice segue la norma ISO 6710, ma è standardizzato, non universale: l'etichetta vale più della tinta.¹ I tubi si riempiono in un ordine preciso per evitare la contaminazione crociata,² vanno riempiti fino al segno e capovolti delicatamente — altrimenti il campione viene rifiutato.⁴¹² Tu non devi gestire nulla di tutto questo: sono i dettagli che rendono affidabili i tuoi risultati. E per capirli, c'è AI DiagMe, in aggiunta al parere del tuo medico.

Fonti

Fonti istituzionali e professionali italiane e pubblicazioni scientifiche (PubMed) utilizzate per questa guida:

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Footnotes

1. Greiner Bio-One — Sistema per il prelievo di sangue sottovuoto, istruzioni per l'uso in italiano, doc. 980200 Rev. 24 (05-2022) : conformità allo standard internazionale ISO 6710 «Contenitori monouso per il prelievo di campioni ematici venosi» e alle direttive CLSI ; tabella dei codici colore dei tappi (azzurro = citrato di sodio 3,2%/3,8% ; rosso oppure rosso/oro = siero con attivatore ± separatore ; verde = eparina di litio o di sodio ; lavanda = K2/K3EDTA ; grigio = inibitore glicolitico fluoruro di sodio + K3EDTA oppure ossalato di potassio ; blu savoia = elementi in tracce ; rosa = prove crociate ; giallo = ACD/CPDA per gruppo sanguigno) ; nota «Esempio di colori standard. Il colore del tappo può variare per quantitativi di ordine specifici e/o per adempimento ai requisiti locali» ; rapporto citrato/sangue 1 : 9 ; sequenza raccomandata basata su CLSI GP41 7ª edizione ; capovolgimenti e avvertenze su schiuma, emolisi e coagulazione. gbo.com ↩ ↩² ↩³ ↩⁴ ↩⁵ ↩⁶ ↩⁷ ↩⁸ ↩⁹ ↩¹⁰ ↩¹¹ ↩¹² ↩¹³ ↩¹⁴ ↩¹⁵

2. SIBioC — Simundic AM, Bölenius K, Cadamuro J, et al. Raccomandazione congiunta EFLM-COLABIOCLI per il prelievo di sangue venoso (traduzione italiana pubblicata come Documento SIBioC). Biochimica Clinica, 2018;43(2):204-227 — punto 10.1 (ordine di prelievo: emocoltura, citrato, siero/attivatore, eparina, EDTA, inibitore della glicolisi, altre), punto 10.2 (provetta di scarto con set a farfalla), punto 10.3 (riempimento completo, evitare < 90% del volume), punti 12-18 (capovolgimento: 1 inversione subito + 4 alla fine, totale 5), e la conclusione «raccomandiamo che l'ordine di prelievo sia seguito senza eccezioni durante ogni prelievo di sangue». eflm.eu · originale: PubMed · DOI ↩ ↩² ↩³ ↩⁴ ↩⁵ ↩⁶ ↩⁷ ↩⁸ ↩⁹ ↩¹⁰

3. Cadamuro J, Felder TK, Oberkofler H, Mrazek C, Wiedemann H, Haschke-Becher E. Relevance of EDTA carryover during blood collection. Clin Chem Lab Med, 2015;53(8):1271-8 — magnesio, calcio e potassio alterati dalla contaminazione con K3EDTA ; con sistema chiuso sottovuoto la contaminazione è improbabile e servirebbero > 10 µL di sangue con EDTA per alterare i risultati. PubMed · DOI ↩ ↩² ↩³ ↩⁴

4. Adcock DM, Kressin DC, Marlar RA. Minimum specimen volume requirements for routine coagulation testing: dependence on citrate concentration. Am J Clin Pathol, 1998;109(5):595-9 — il sotto-riempimento allunga artificialmente PT e aPTT, con effetto più marcato usando citrato al 3,8%. PubMed · DOI ↩ ↩² ↩³ ↩⁴

5. Ospedale Pediatrico Bambino Gesù — Campione emolizzato : «L'emolisi consiste nella rottura dei globuli rossi con conseguente dissoluzione dell'emoglobina nel plasma o siero» ; «La causa più frequente di non conformità (40 – 70%) è rappresentata dal campione emolizzato» ; cause meccaniche (aghi di calibro troppo piccolo, laccio emostatico troppo stretto, prelievi traumatici) e analiti interessati (potassio, sodio, cloro, enzimi, AST, LDH). ospedalebambinogesu.it ↩ ↩² ↩³

6. ASST della Valcamonica — Tipologia delle provette, Allegato n. 003 al PT LAB 001, Rev. 03 del 07.10.2022 : tabella settore/esami – codice colore – additivo – volume (viola EDTA K2 3 mL per emocromo, reticolociti, formula e VES ; azzurro citrato di sodio 0,109 M 2,7 mL per PT, PTT, fibrinogeno, antitrombina, D-dimero ; verde eparina di litio 4 mL per la chimica clinica d'urgenza ; blu chiaro attivatore + separatore 3,5 mL per la chimica clinica di routine, i marcatori tumorali e l'endocrinologia ; blu notte EDTA K2 per emoglobina glicata ed elettroforesi dell'emoglobina ; ruggine per la sierologia infettiva ; grigio FC Mix / fluoruro-ossalato per glicemia e tossicologici). asst-valcamonica.it ↩ ↩² ↩³ ↩⁴ ↩⁵ ↩⁶ ↩⁷

7. Ospedale Pediatrico Bambino Gesù — Esami del sangue : fasi del prelievo venoso, tra cui «raccolta campioni, secondo la corretta sequenza delle provette» ; indicazioni sul digiuno per fascia d'età. ospedalebambinogesu.it ↩

8. Keppel MH, Auer S, Lippi G, von Meyer A, Cornes M, Cadamuro J, et al. Heparin and citrate additive carryover during blood collection. Clin Chem Lab Med, 2019;57(12):1888-1896. PubMed · DOI ↩ ↩²

9. Ercan Ş, Ramadan B, Gerenli O. Order of draw of blood samples affect potassium results without K-EDTA contamination during routine workflow. Biochem Med (Zagreb), 2021;31(2):020704 — su 388 pazienti nessuna contaminazione da K-EDTA, ma l'ordine di prelievo influenza comunque il potassio. PubMed · DOI ↩ ↩²

10. Cornes M, van Dongen-Lases E, Grankvist K, et al. (EFLM Working Group for the Preanalytical Phase). Order of blood draw: Opinion Paper by the European Federation for Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (EFLM) Working Group for the Preanalytical Phase (WG-PRE). Clin Chem Lab Med, 2017;55(1):27-31. PubMed · DOI ↩ ↩²

11. Lippi G, Salvagno GL, Montagnana M, Brocco G, Guidi GC. Influence of hemolysis on routine clinical chemistry testing. Clin Chem Lab Med, 2006;44(3):311-6 — sovrastima di ALT, AST, creatinina, CK, ferro, LDH, lipasi, magnesio, fosforo, potassio e urea ; sottostima di albumina, ALP, cloro, GGT, glucosio e sodio ; variazioni clinicamente rilevanti già con emolisi appena visibile. PubMed · DOI ↩

12. Ospedale Pediatrico Bambino Gesù — Non idoneità del campione biologico: il campione coagulato : definizione di campione coagulato, cause («quando il prelievo è difficoltoso e prolungato nel tempo», «quando, al momento del prelievo, la provetta non viene adeguatamente miscelata capovolgendola»), esami interessati (emocromo, coagulazione, VES, ammonio, emogasanalisi) e conseguenza (nuovo prelievo). ospedalebambinogesu.it ↩ ↩² ↩³

13. AVIS — Linee guida, I tipi di donazione : «L'attuale normativa prevede un prelievo di 450 mL di sangue» ; recupero dei globuli rossi entro 7-10 giorni e del plasma in poche ore/pochi giorni. lineeguida.avis.it ↩ ↩²

14. Siegal DM, Belley-Côté EP, Lee SF, et al. Small-Volume Blood Collection Tubes to Reduce Transfusions in Intensive Care: The STRATUS Randomized Clinical Trial. JAMA, 2023;330(19):1872-1881 — 25 terapie intensive ; analisi principale non significativa, analisi secondaria preordinata su 27 411 pazienti con riduzione delle trasfusioni ; campioni di quantità insufficiente ≤ 0,03%. PubMed · DOI

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